Niš er den tredje største byen i Serbia og hovedstaden i Sør-Serbia (etter Beograd og Novi Sad). Det fungerer som det administrative knutepunktet i Nišava-distriktet. I følge folketellingen for 2011 har byen en befolkning på 183,164, mens Niš-byområdet (inkludert det nærliggende urbane samfunnet Niška Banja) har en befolkning på 187,544; det administrative området har en befolkning på 260,237 2016.
Det er en av de eldste byene på Balkan og Europa, og har lenge vært sett på som et veiskille mellom øst og vest. Det ble bygget i 279 f.Kr. av Scordisci under en Balkan-invasjon. Byen var en av flere tatt i den romerske erobringen i 75 f.Kr.; i det første århundre bygde romerne Via Militaris, med Naissus som en av de viktigste byene; det er også fødestedet til Konstantin den store, den første kristne keiseren og grunnleggeren av Konstantinopel, samt Konstantius III og Justin I. Det er hjemmet til en av Serbias eldste kirker, som dateres tilbake til det 4. århundre og ligger i Mediana-området. Det østromerske (bysantinske) riket styrte over Balkan. Slavere begynte å bebo Balkan i det sjette århundre, og byen ble kontrollert av bysantinene frem til det niende århundre, da den falt under bulgarsk kontroll. Byen ble ført mellom de to inntil den ble gitt til serberne av bysantinene på 12-tallet. Stefan Nemanjas hovedstad var Niš. Det ble tatt av ottomanerne på 15-tallet, og det ble sete for en sanjak, først i Rumelia Eyalet (1385-1443, 1448-1846), deretter i Niš Eyalet (1846-1864), og til slutt i Donau Vilayet ( 1864-1878). Under den serbisk-osmanske krigen (1876–78) frigjorde den serbiske hæren den i 1878.
Niš er et av Serbias mest store industrielle knutepunkter, hjemmet til elektronikk-, maskin-, tekstil- og tobakksindustrien. Den internasjonale flyplassen er Konstantin den store flyplass. I 2013 var byen vertskap for 1700-årsjubileet for Konstantins Edikt av Milano.