Guanajuato on kaupunki ja kunta Keski-Meksikossa. Se toimii samannimisen osavaltion pääkaupunkina. Se kuuluu Bajon makroalueeseen. Se sijaitsee pienessä laaksossa, mikä johtaa pieniin ja mutkaisiin katuihin. Suurin osa niistä on kapeita kaistaa, joihin ei pääse autolla, kun taas osa on pitkiä portaikkoja, jotka nousevat vuoren rinteille. Lukuisat kaupungin väylät ovat osittain tai kokonaan maanalaisia. Historiallisella alueella on lukuisia pieniä aukioita ja siirtomaa-ajan koteja, kirkkoja ja vaaleanpunaisesta tai vihreästä hiekkakivestä rakennettuja yhteiskunnallisia rakenteita.
Guanajuato perustettiin ja kasvoi sen seurauksena, että ympäröivistä vuorista löydettiin mineraaleja. Kaivosten rikkauden ansiosta kaupunki oli yksi voimakkaimmista koko siirtomaavallan ajan. Huipussaan yksi kaivoksista, La Valenciana, tuotti kaksi kolmasosaa maailman hopeasta.
Kaupungissa sijaitsee Muumiomuseo, jossa on luonnollisesti muumioituneita jäänteitä, jotka löydettiin 19-luvun puolivälin ja 20-luvun alun välillä kunnalliselta hautausmaalta. Lisäksi se on Festival Internacional Cervantino -festivaali, joka houkuttelee taiteilijoita ja viihdyttäjiä ympäri maailmaa sekä Meksikosta. Guanajuato oli Meksikon vapaussodan ensimmäisen toiminnan kohtaus, joka tapahtui Alhóndiga de Granaditasissa kapinallisten ja kuninkaallisten joukkojen välillä. Vuonna 1988 kaupunki nimettiin Unescon maailmanperintökohteeksi.