Niš er den tredjestørste by i Serbien og hovedstaden i det sydlige Serbien (efter Beograd og Novi Sad). Det fungerer som det administrative knudepunkt for Nišava-distriktet. Ifølge folketællingen i 2011 har byen en befolkning på 183,164, mens Niš-byområdet (inklusive det nærliggende bysamfund Niška Banja) har en befolkning på 187,544; det administrative område har en befolkning på 260,237.
Det er en af de ældste byer på Balkan og Europa, og har længe været betragtet som en korsvej mellem øst og vest. Det blev bygget i 279 f.Kr. af Scordisci under en Balkan-invasion. Byen var en af flere taget under den romerske erobring i 75 f.Kr.; i det første århundrede byggede romerne Via Militaris, hvor Naissus var en af dens nøglebyer; det er også fødestedet for Konstantin den Store, den første kristne kejser og grundlæggeren af Konstantinopel, samt Konstantius III og Justin I. Det er hjemsted for en af Serbiens ældste kirker, som går tilbage til det 4. århundrede og er beliggende i Mediana området. Det østromerske (byzantinske) imperium herskede over Balkan. Slavere begyndte at bebo Balkan i det sjette århundrede, og byen blev kontrolleret af byzantinerne indtil det niende århundrede, hvor den faldt under Bulgarsk kontrol. Byen blev overført mellem de to, indtil den blev givet til serberne af byzantinerne i det 12. århundrede. Stefan Nemanjas hovedstad var Niš. Det blev taget af osmannerne i det 15. århundrede, og det blev sæde for en sanjak, først i Rumelia Eyalet (1385-1443, 1448-1846), derefter i Niš Eyalet (1846-1864) og til sidst i Donau Vilayet ( 1864-1878). Under den serbisk-osmanniske krig (1876-78) befriede den serbiske hær den i 1878.
Niš er et af Serbiens største industrielle knudepunkter, hjemsted for elektronik-, mekanik-, tekstil- og tobaksindustrien. Dens internationale lufthavn er Konstantin den Store Lufthavn. I 2013 var byen vært for 1700-året for Konstantins Edikt af Milano.